光敏生物素(Photobiotin)是一类带有光反应活性基团的生物素衍生物,能在特定波长光照下与生物分子(如核酸、蛋白质)快速偶联,兼具生物素的高特异性识别和光控反应的时空可控性,是分子生物学中常用的标记工具。
一、基本信息
- 英文名称:Photobiotin
- 核心结构:由 “生物素(Biotin)” 和 “光敏基团” 通过连接臂(如 PEG 链、烷基链)组成。
- 常见光敏基团:芳香叠氮基(-N₃)、二苯甲酮基、香豆素基等,其中芳香叠氮基最常用(光照后生成高活性氮烯,快速与 C-H、N-H 键反应)。
- 外观:多为浅黄色至白色粉末或固体(因连接臂和光敏基团不同略有差异)。
- 纯度:≥95%。
- 溶解性:溶于水、DMSO、DMF 等极性溶剂,部分疏水连接臂的光敏生物素更易溶于有机溶剂。
- 储存条件:需避光、密封、低温储存(-20℃或 4℃),避免提前接触光照导致活性降低。
- 用途限制:仅用于科研实验(如分子标记、检测),不用于临床或人体应用。
结构式:
cas:136233-53-9 ,photosensitivebiotin,光敏生物素
二、核心特性
- 光控反应,时空可控:无需化学催化剂,仅在特定波长光照(通常为 250-365nm 紫外光)下启动反应,可通过 “光照区域 / 时间” 精准控制标记位点和效率,减少非特异性反应。
- 偶联范围广:能与多种生物分子反应,包括核酸(DNA、RNA)、蛋白质、多糖等,且不依赖特定官能团(如氨基、羧基),只需分子含 C-H、N-H 等惰性键即可偶联。
- 保留生物活性:标记后生物素仍能与亲和素 / 链霉亲和素高效结合(Kd≈10⁻¹⁵ M),不影响后续的分离、纯化或检测;且光反应条件温和(常温、中性 pH),不易破坏生物分子结构。
三、使用关键注意事项
- 光照条件控制:需根据光敏基团选择合适波长(如芳香叠氮基用 300-365nm 紫外光),避免光照过强 / 过久导致生物分子变性,建议提前通过预实验确定最佳光照时间(通常几秒至几分钟)。
- 反应体系选择:水溶性光敏生物素优先用中性水溶液(如 PBS),脂溶性则用无水有机溶剂(如 DMSO),避免体系中含高浓度巯基(-SH)(可能与光敏中间体反应,降低偶联效率)。
- 后续分离:标记后需通过透析、柱层析等方法去除未反应的游离光敏生物素,避免干扰后续的 “生物素 - 亲和素” 结合反应。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!
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