RH 421,又名[三苯甲基偶氮化物衍生物],是一种常用的膜电位敏感荧光染料,属于电荷转移型荧光探针。其化学结构以疏水性芳香环和阳离子染料核心为特征,使其能够有效嵌入生物膜脂双层中,从而对膜电位变化表现出敏感的荧光响应。
从光学特性来看,RH 421具有明显的光吸收峰和荧光发射峰。在通常的生理条件下,其主要吸收波长在600 nm左右,而荧光发射位于700 nm左右,属于红至近红外区域。这种长波长发射的特性使得RH 421能够在复杂的生物体系中减少背景干扰,并且有利于穿透较厚的样品,如心肌或神经组织切片。此外,RH 421的荧光强度与膜电位呈非线性相关,其响应速度极快,可达到毫秒级,适合监测快速的电生理事件,如神经冲动传导或肌肉动作电位变化。
英文名称: NEURODYE RH-421
中文名称: NEURODYE RH-421;4-{4-[4-(DIPENTYLAMINO)PHENYL]-1,3-BUTADIENYL}-1-(4-SULFOBUTYL)PYRIDINIUM HYDROXIDE
MF: C29H42N2O3S
MW: 498.72
CAS: 107610-19-5
在应用上,RH 421被广泛用于研究细胞膜电位动态和膜电位相关的生物学过程。其高灵敏度和快速响应特性,使得研究者能够在单细胞水平甚至亚细胞水平实时监测膜电位变化。例如,在神经科学研究中,RH 421可用于记录神经元的动作电位传播和突触前后膜电位的变化,为理解神经信号传递机制提供重要工具。在心脏生理研究中,RH 421常用于观察心肌细胞动作电位波形和电传导速度,有助于研究心律调控和电生理异常。此外,RH 421还可以与其他荧光探针组合,进行多通道成像,实现膜电位与钙离子浓度或pH值变化的同步监测,拓展其在细胞信号研究中的应用范围。
在实验操作上,RH 421一般以微摩尔级浓度溶解于有机溶剂中,如DMSO或乙醇,再稀释至生理缓冲液使用。由于其较强的疏水性和膜嵌入特性,染料的加入需保证充分混匀,以避免局部浓度过高引起的荧光淬灭或膜结构扰动。RH 421的荧光信号易受温度、pH及离子强度影响,因此实验条件需严格控制,以确保数据可靠性。使用时,通常配合高速荧光成像系统或光学显微镜,可获得高时空分辨率的膜电位动态图像。
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