Di-8-ANEPPS，全名为4-(2-(6-(dioctylamino)-2-naphthalenyl)ethenyl)-1-(3-sulfopropyl)pyridinium，是一种常用的膜电位敏感荧光探针，属于ANEPPS系列染料（Aminonaphthylethenylpyridinium）。该系列探针以其高灵敏度和快速响应特性在膜电位研究中广泛应用，而Di-8-ANEPPS通过在分子结构中引入长烷基链增强了疏水性，从而提高了膜嵌入能力和信号稳定性。Di-8-ANEPPS分子中包含带正电荷的吡啶基团和共轭芳香系统，使其能够在脂质双层膜中定向嵌入，并对膜电位的变化产生快速的荧光响应。其化学式为C_34H_58N_2O_3S，分子量约为562.9 g/mol。

在光学性质方面，Di-8-ANEPPS属于极化敏感染料，其吸收峰通常在470–490 nm范围，发射峰在605–620 nm区域，呈现红光荧光。这一长波长发射特性使其在细胞和组织成像中能够减少自发荧光背景，提高信噪比。

英文名称： DI-8-ANEPPS

中文名称： DI-8-ANEPPS

MF： C36H52N2O3S

MW： 592.87

CAS： 157134-53-7

Di-8-ANEPPS在实验应用中主要用于测量细胞膜电位动态、动作电位波形以及膜电位相关的细胞信号传导过程。它广泛应用于神经元、心肌细胞及其他兴奋性细胞的电生理研究。在神经科学研究中，Di-8-ANEPPS可用于记录神经元的动作电位传播、突触前后膜电位变化及神经网络活动模式。在心脏研究中，该探针常用于观察心肌动作电位波形、电传导速度及电生理异质性，为研究心肌电信号调控和节律性提供关键数据。此外，Di-8-ANEPPS还可结合高速成像系统进行全细胞或组织层面的膜电位监测，实现高时空分辨率成像。

在实验操作方面，Di-8-ANEPPS通常以微摩尔浓度溶解于有机溶剂如DMSO中，再稀释至生理缓冲液中使用。由于其疏水性较强，染料在加入体系时需充分混匀，以确保均匀分布，避免局部高浓度导致荧光淬灭或膜扰动。在染料加载过程中，通常短时间孵育即可获得稳定的膜信号。Di-8-ANEPPS对温度、pH及离子强度敏感，因此实验条件需严格控制以获得可靠数据。染料具有较高的光稳定性，但长时间激发仍可能发生光漂白，因此建议使用低光强或间歇激发条件进行成像。

Di-8-ANEPPS除了单独应用外，还可与其他荧光探针组合，进行多通道成像。例如，可同时监测膜电位与钙离子浓度变化，实现对细胞信号传导和膜电位耦合机制的综合研究。此外，由于其长波长发射，Di-8-ANEPPS可用于厚组织片或离体器官的荧光成像，扩大了实验的应用范围。

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